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如何培養小鼠小膠質BV2細胞？
更新更新時間：2024-11-17 瀏覽次數：1250
培養小鼠小膠質BV2細胞需要遵循一系列特定的步驟和注意事項，以確保細胞的健康生長和實驗的準確性。以下是培養BV2細胞的一般步驟：
一、準備階段
1、培養基準備：使用DMEM高糖培養基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（P/S）。
2、環境控制：確保培養箱內的空氣占95%，二氧化碳濃度為5%，溫度保持在37℃。
二、復蘇階段
1、提前將水浴鍋預熱至37℃，培養基復溫至室溫或37℃，離心機設置好轉速。
2、從液氮罐中取出細胞，迅速搖晃直至融化至米粒大小冰塊時終止水浴，整個過程不超過2分鐘。
3、直接將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心2分鐘，棄上清，用預熱的培養基緩慢加入凍存管，輕柔重懸細胞后接種至培養瓶中。
三、傳代階段
1、輕輕吸走培養上清，留2-3mL培養基輕輕吹打細胞面吹下細胞。
2、將細胞懸液轉移至離心管，900rpm離心3-5分鐘，棄上清。
3、加新的全培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里，補足全培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養。
四、凍存階段
1、配制程序性凍存液，推薦配方為92%FBS+8%DMSO或92%全培養基+8%DMSO。
2、先將細胞按傳代步驟獲得細胞沉淀，加入適量程序性凍存液輕輕重懸細胞，并將細胞懸液轉移至凍存管中。
3、將凍存管放入程序性凍存盒，放入-80℃冰箱過夜，然后轉移至液氮保存并登記細胞保存位置。
總之，培養小鼠小膠質BV2細胞需要嚴格控制培養條件、及時處理細胞狀態變化，并遵循規范的操作流程。通過這些措施，可以確保BV2細胞的健康生長和實驗的順利進行。
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